Lignée cellulaire endothéliale veineuse ombilicale humaine

Immortalisation des cellules endothéliales veineuses ombilicales humaines HUVEC

L identification des cellules

Identification par immunofluorescence passée

L source des cellules

Bibliothèque de ressources nationales (Académie chinoise de Shanghai)

L fond cellulaire

La lignée de cellules endothéliales veineuses ombilicales humaines HUVEC a été construite plus tôt par ATCC aux États - Unis et a ensuite été largement utilisée, mais ces dernières années, la contamination croisée à la source des cellules a été découverte, elle a été retirée des étagères internationales et les États - Unis ont également identifié des problèmes cellulaires, de sorte qu'une nouvelle marque HUVEC a été créée, mais à l'heure actuelle, cette cellule a été introduite dans le pays après que les semences sont en mauvais état et ne peuvent pas être utilisées. Il est donc difficile de trouver sur le marché des cellules endothéliales veineuses ombilicales humaines huve - C en bon état pouvant être utilisées. Notre société est également parce qu'il n'y a pas de cellules appropriées en même temps en bon état et précis, donc nous avons fait une lignée de cellules primaires domestiques immortalisées pour obtenir une nouvelle cellule précise: cellules endothéliales de veine ombilicale humaine immortalisées. Fournit une seule identification immunofluorescente de Marker de cellules endothéliales. Nom de la cellule: cellules endothéliales ombilicales humaines immortalisées, et huve - C sont le même type de cellules, les deux appartiennent aux cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine, seulement appelé différemment, et parce qu'il est une lignée nationale, il ne peut pas fournir l'identification Str, mais plutôt l'identification par immunofluorescence.

L caractéristiques des cellules

1) Source: tissu ombilical humain

2) morphologie: croissance endothéliale comme une paroi

3) Contenu: > 1x106 nombre de cellules

4) Spécification: bouteille de t25 ou paquet de lyophilisateur de 1ml

5) Utilisation: utilisation scientifique seulement.

L conditions de culture:

1) préparer un système de culture de cellules endothéliales (recommandé: primed - awcell - 002)

Milieu de base de culture de cellules endothéliales 93%

Sérum de veau foetal (FBS) 5%

Additif de culture de cellules endothéliales 1%

Pénicilline / streptomycine, P/S 1%

2) conditions de culture: phase gazeuse: air, 95%; CO2, 5%. Température: 37 ℃, l'humidité de l'incubateur est de 70% - 80%.

L Notes:

La lignée cellulaire endothéliale veineuse ombilicale humaine HUVEC peut se référer aux méthodes suivantes pour le passage des cellules adhérentes:

1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

Ajouter 0,25% (P / v) trypsine - 0,53 mm EDTA dans un flacon de culture (flacon t25 1 - 2 ml, flacon T75 2 - 3 mL), placer dans un incubateur à 37 ° C pendant 1 - 2 minutes pour la digestion (les cellules difficiles à digérer peuvent prolonger correctement le temps de digestion), puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si une grande partie des cellules s'arrondit et tombe, revenir rapidement à la table d'opération, tapoter quelques flacons de culture après l'ajout de 3 - 4 ml de milieu de culture contenant 10 s pour terminer la digestion.

3. Bien mélanger doucement et bien aspirer, centrifuger à 1000 RPM pendant 3 - 5 min, jeter le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de solution de culture et bien souffler. La suspension cellulaire est divisée dans de nouveaux flacons t25 dans un rapport de 1: 2, 6 - 8 ml d'un nouveau * Milieu configuré selon les instructions sont ajoutés pour maintenir la viabilité de croissance des cellules, et les passages suivants sont effectués dans un rapport de 1: 2 ~ 1: 5 selon la réalité.

3) lyophilisation cellulaire: après réception des cellules, il est recommandé de lyophiliser un lot de semences cellulaires pour une utilisation expérimentale ultérieure au cours des 3 premières générations de culture.

L forme de transport:

Basse température: (1) 1ml tube de congélation emballé pour le transport de glace sèche, après réception - 80 degrés réfrigérateur conservé pendant la nuit après le transfert à l'azote liquide ou la réanimation directe, si la glace sèche a été volatilisée propre, le bouchon du tube de congélation est tombé, cassé et les cellules sont contaminées, s'il vous plaît contactez - nous immédiatement.

Température normale (2) Les cellules viables réanimées par flacon t25 sont expédiées à température normale, après réception, en suivant la méthode de traitement après réception cellulaire.

L biosécurité

Toutes les cellules animales sont considérées comme potentiellement dangereuses sur le plan biologique et doivent être manipulées à l'intérieur d'une table de sécurité biologique de niveau 2, veuillez prendre soin de la protection, tous les déchets liquides et les ustensiles qui ont été en contact avec ces cellules doivent être éliminés après stérilisation.

2. Il est toujours recommandé d'utiliser des gants de protection, des vêtements et de porter un masque de protection lors de la réanimation des cellules conservées congelées. Remarque: l'immersion du lyophilisateur dans l'azote liquide peut fuir et se remplir lentement d'azote liquide. Lors de la décongélation, la transformation de l'azote liquide en phase gazeuse peut provoquer l'explosion du récipient ou le soufflage de son couvercle avec une force dangereuse, créant ainsi des débris volants causant des blessures aux personnes.