Cellules rénales embryonnaires humaines 293t

Hek - 293t cellules rénales embryonnaires humaines

Hé, 293t '293t'.

L identification des cellules

La qualification Str est passée

L source des cellules

Bibliothèque de ressources nationales

L fond cellulaire

Les cellules Hek - 293t sont des dérivés de la lignée cellulaire 293t (293tsa1609neo) (ATCC CRL - 11268). Les cellules expriment en permanence l'antigène SV40 et cette cellule est couramment utilisée dans les expériences de transfection avec une efficacité de transfection plus élevée. (la transfection est généralement étalée à 50% de densité, après que les cellules viennent d'être collées sur la paroi de la boîte (généralement 8 - 10 heures), l'opération de transfection peut être effectuée)

L caractéristiques des cellules

1) Source: rein embryonnaire humain

2) morphologie: cellules épithéliales comme, croissance de la paroi, faible capacité de paroi

3) Contenu: > 1x106 nombre de cellules

4) Spécification: bouteille de t25 ou paquet de lyophilisateur de 1ml

5) Utilisation: utilisation scientifique seulement

L conditions de culture:

1) Préparer le milieu dmem (awcell - 0001 recommandé); Sérum de veau foetal de haute qualité, 10%; L - glutamine (2 mm) 1%; NEAA 1% ； Double résistance 1%

2) conditions de culture: phase gazeuse: air, 95%; CO2, 5%. Température: 37 ℃, l'humidité de l'incubateur est de 70% - 80%.

L Notes:

Cette cellule est une cellule suspendue et légèrement plaquée, le passage peut se référer aux méthodes suivantes:

1. Collecte: les cellules en suspension dans le flacon de culture sont collectées dans le tube de centrifugation. Les cellules sont rincées 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium, magnésium. Étant donné que les cellules se détachent après le lavage du PBS, le PBS est également recyclé dans le tube de centrifugation.

Ajouter 0,25% (P / v) trypsine - 0,53 mm EDTA dans un flacon de culture (flacon t25 1 - 2 ml, flacon T75 2 - 3 mL) dans un incubateur à 37 ° C pendant 1 - 2 minutes pour la digestion (les cellules difficiles à digérer peuvent prolonger le temps de digestion correctement), puis observer la digestion des cellules au microscope, si la plupart des cellules deviennent arrondies et tombent rapidement revenir à la table d'opération, tapoter quelques flacons de culture après l'ajout de 3 - 4 ml de milieu contenant 10 s pour terminer la digestion.

3. Centrifuger les cellules en suspension recueillies, les cellules de PBS Cleanse et les cellules épitaxiées digérées à 1000 rpml pendant 5 min, éliminer le surnageant, distribuer la suspension cellulaire dans un nouveau flacon t25 dans un rapport de 1: 2 après remise en suspension après supplément de 1 - 2 ml de solution de culture, ajouter 6 - 8 ml d'un nouveau * Milieu configuré conformément aux exigences des instructions pour maintenir la viabilité de la croissance des cellules, et les passages suivants sont effectués dans un rapport de 1: 2 ~ 1: 5 selon la situation réelle.

Cellules de rein embryonnaire humain 293t lyophilisation: après réception des cellules, il est recommandé de congeler un lot de semences cellulaires pour une utilisation expérimentale ultérieure au cours des 3 premières générations de culture.

L forme de transport:

Basse température: (1) 1ml tube de congélation emballé pour le transport de glace sèche, après réception - 80 degrés réfrigérateur conservé pendant la nuit après le transfert à l'azote liquide ou la réanimation directe, si la glace sèche a été volatilisée propre, le bouchon du tube de congélation est tombé, cassé et les cellules sont contaminées, s'il vous plaît contactez - nous immédiatement.

Température normale (2) Les cellules viables réanimées par flacon t25 sont expédiées à température normale, après réception, en suivant la méthode de traitement après réception cellulaire.

L biosécurité:

Toutes les cellules animales sont considérées comme potentiellement dangereuses sur le plan biologique et doivent être manipulées à l'intérieur d'une table de sécurité biologique de niveau 2, veuillez prendre soin de la protection, tous les déchets liquides et les ustensiles qui ont été en contact avec ces cellules doivent être éliminés après stérilisation.

2. Il est toujours recommandé d'utiliser des gants de protection, des vêtements et de porter un masque de protection lors de la réanimation des cellules conservées congelées. Remarque: l'immersion du lyophilisateur dans l'azote liquide peut fuir et se remplir lentement d'azote liquide. Lors de la décongélation, la transformation de l'azote liquide en phase gazeuse peut provoquer l'explosion du récipient ou le soufflage de son couvercle avec une force dangereuse, créant ainsi des débris volants causant des blessures aux personnes.