Activité lactate déshydrogénase (méthode wst - 8) microméthode

Activité lactate déshydrogénase (méthode wst - 8) microméthodePrincipe de déterminationEst par détectionLDHDans le processus de réduction catalytique du pyruvate en acide lactiqueNADHQuantité générée pour déterminer indirectementLDHL'activité.

Le processus spécifique est le suivant:

Principe de réaction:DansLDHSous l'effet de,NAD+Généré par restoreNADH- Oui.NADHAvecWST-8L'interaction produit une couleur et donc une détermination colorimétrique (λmax = 450 nm)).

Conditions de réaction:LDHSeraNADRestaurer àNADH,NADHAvecWST-8L'interaction produit des couleurs. Cette réaction est effectuée à l'abri de la lumière sur la glace, les composants (tels queTampon d'essaiEt,lactateEt,NADEt,WST-8Et,Améliorateur), doit être retiré du réfrigérateur et équilibré à la température ambiante avant l'expérience, l'ensemble du processus doit être protégé de la lumière.

Mesure d'Absorbance:Dans450 nmMesure de l'Absorbance à la longueur d'onde, Absorbance avecLDHL'activité est proportionnelle et peut être déterminée par colorimétrieLDHActivité.

Étapes expérimentales et équipement requis:

Étapes expérimentales:Liquide de préparation (1×Tampon d'essaiEt,NADEt,WST-8Et,AméliorateuretlactateBien mélanger), ajouter le liquide de travail96Dans une plaque d'orifice ou un microverre, ajouter l'échantillon à tester,37℃ l'Absorbance est mesurée après une certaine période d'incubation à température constante.

Équipement requis:Jauge enzymatique ou spectrophotomètre visible (mesure de l'énergie)450 nmAbsorbance à l'endroit), incubateur, machine à glace, centrifugeuse cryogénique,96Plaque à orifices ou microverre, pistolet à pipette réglable et tête de pistolet, eau désionisée, homogénateur (si échantillon de tissu).

Note expérimentale‌:

Préservation des réactifs:Les groupes (tels queTampon d'essaiEt,lactateEt,NADEt,WST-8Et,Améliorateur), doit être conservé sur la glace à l'abri de la lumière et éviter le gel et la dégel répétés.

Notes opérationnelles:L'ensemble du processus expérimental doit être effectué à l'abri de la lumière sur la glace, afin d'éviter que la lumière n'affecte les résultats‌.

Activité lactate déshydrogénase (méthode wst - 8) microméthodeProduits dans lesquels la société opère:

1 x 10^6 cellules/flaconPré - Adipocytes humains - sous - cutanéHPA

5 x 10^5 cellules/flaconCellules endothéliales microvasculaires ovariennes humainesHOMEC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules épithéliales superficielles des ovaires humainsHOSEpiC

5 x 10^5 cellules/flaconFibroblastes ovariens humainsHOF

5 x 10^5 cellules/flaconCellules stromales mésenchymateuses amniotiques humainesHAMSC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules stromales mésenchymateuses chorioniques humainesHCMSC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules souches mésenchymateuses de moelle osseuse humaineHMSC-bm

5 x 10^5 cellules/flaconCellules souches mésenchymateuses adipeuses humainesHMSC-ad

5 x 10^5 cellules/flaconCellules souches mésenchymateuses du foie humainHMSC-hp

5 x 10^5 cellules/flaconCellules souches mésenchymateuses du cordon ombilical humainHUMSC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules souches mésenchymateuses pulmonaires humainesHPMSC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules souches mésenchymateuses de la colonne vertébrale humaineHVMSC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules endothéliales microvasculaires mammaires humainesHMMEC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules épithéliales mammaires humainesHMEpiC

5 x 10^5 cellules/flaconFibroblastes mammaires humainsHMF

5 x 10^5 cellules/flaconCellules endothéliales veineuses ombilicales humainesHUVEC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules endothéliales de l'artère ombilicale humaineCellules endothéliales artérielles du cordon ombilical humain

5 x 10^5 cellules/flaconCellules musculaires lisses veineuses ombilicales humainesHUVSMC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules musculaires lisses de l'artère ombilicale humaineHUASMC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules pituitaires de ratRPC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules de la membrane cérébrale de ratRMC

1 x 10^6 cellules/flaconNeurones spinaux du cerveau de ratRN-R

1 x 10^6 cellules/flaconNeurones corticaux de ratRN-c

1 x 10^6 cellules/flaconCellules granulaires de ratRGC

1 x 10^6 cellules/flaconNeurones hippocampiques de ratRN-h

1 x 10^6 cellules/flaconNeurones de la substance noire de ratRN-sn

1 x 10^6 cellules/flaconNeurones striatum de ratRN-s

1 x 10^6 cellules/flaconNeurones de la moelle épinière abdominale de ratRN-VSC

1 x 10^6 cellules/flaconNeurones de la moelle épinière dorsale de ratRN-DSC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules précurseurs oligodendroïdes de ratROPC

5 x 10^5 cellules/flaconCellules de Schwann de ratRSC

5 x 10^5 cellules/flaconFibroblastes périneuraux de ratRpnf

5 x 10^5 cellules/flaconAstrocytes de ratRA