BCA Kit de détermination de la teneur en protéines de méthode instructions

Méthode des traces 100T/96S

Toujours prendre avant la détermination officielle 2 - 3 Un échantillon avec de grandes différences attendues fait des prédictionsDétermination de la signification:

La teneur en protéines solubles de l'échantillon est souvent utilisée dans le calcul de l'activité enzymatique. En outre, la teneur en protéines solubles est également utilisée pour des analyses de qualité telles que les aliments.

Principe de détermination:

Dans des conditions alcalines, la protéine dans l'acide cystéanique, l'acide cystéanique, l'acide chromatique, l'acide tyrosique et les liaisons peptidiques, peut Cu^{2 +}Réduit àCu^{Le +};2 MoléculesdeBCAAvecCu^{Le +}Se liant, produisant un complexe violet, dans 540-595nmIl y a des pics d'absorption,562nmPic d'absorption zui forte.

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Composition:

Formulation du liquide de travail:Avant utilisation provisoire, selon le volume de liquide de travail proposé (nombre d'échantillons)×0,2 ml), mettre le réactifA etB selon 50Pour:1 Mélange proportionnel, couvercleBien mélanger après serrage.

Les paramètres du produit spécifique sont soumis aux paramètres de la description du produit reçu

Instruments et fournitures propres:

Centrifugeuse de table, bain - Marie thermostatique, spectrophotomètre visible/Marqueur enzymatique, cuvette colorimétrique à traces de quartz/ 96 Plaque à puits, pipette et eau distillée.

Extraction de protéines solubles dans l'échantillon:

1échantillons liquides:L'échantillon liquide clarifié peut être déterminé directement.

2, échantillons d'organisation: selon la qualité de l'Organisation (g): volume de liquide extrait(ml)pour 1Pour:5 à 10 Proportion (Recommander de prendre rendez - vous 0.1g Organisation, adhérer 1 mlExtrait (autonome, en utilisant un tampon d'extraction enzymatique ou de l'eau distillée ou physiologique au besoin)Homogénat de bain de glace,10000rpm,4℃Centrifugation 10 minutesRetirer, c'est - à - dire mesurer le liquide.

3 Bactéries, cellules: par nombre de cellules (104 Une): volume de liquide extrait (ml) etpour 500 ~ 1000Pour:1 Proportion (conseil 500 Millions de cellulesAdhérer 1 ml Liquide d'extraction) et, bain de glace ultrasons briser les cellules（puissance 300w, ultrasons 3 Secondes, intervalles 7 Secondes, temps total 3min) et; puis 10000rpm, 4℃, centrifugation 10 minutesPrendre sur la glace à mesurer.

Opération de détermination:

1. Spectrophotomètre visible/Préchauffage de l'étalon enzymatique 30 minutes, régule la longueur d'onde à 562 nmL'eau distillée est mise à zéro.

2. Liquide de travail placé 60℃ préchauffage du bain d'eau30 min- Oui.

Précautions:Les tubes vierges et les tubes standard ne doivent être effectués qu'une seule fois.

Formule de calcul:

CPR (mg/ml) =C Produits standard×(A Tube de détermination -A Tube vide)÷(A Tube standard -A Tube vide) et

= 0,5 ×(A Tube de détermination -A Tube vide)÷(A Tube standard -A Tube vide) et

CPR (mg/g Poids frais) =C Produits standard×(A Tube de détermination -A Tube vide)÷(A Tube standard -A Tube vide)÷W

= 0,5 ×(A Tube de détermination -A Tube vide)÷(A Tube standard -A Tube vide)÷W W : Qualité des échantillons,g

Précautions:

BCA Kit de détermination de la teneur en protéines pour la détermination de la concentration en protéines 20-5000μg/ml L'échantillon. Prendre avant détermination 1 - 2 Pré - expérimentation d'un échantillon, siA Tube de détermination -A Tube vide >1.5L'échantillon doit être dilué avec du liquide d'extraction avant d'être déterminé pour assurer la précision de l'essai.

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